CRYM结构及其酶活分析以及LsrK表达纯化

CAS OpenIR > 中科院上海应用物理研究所2011-2019年

	CRYM结构及其酶活分析以及LsrK表达纯化
	许新磊
Subtype	硕士
Thesis Advisor	何建华
	2012-05
Degree Grantor	中国科学院研究生院
Degree Discipline	生物物理学
Keyword	T3结合蛋白晶体结构酮亚胺还原酶酶活位点
Abstract	人源CRYM与NADPH复合物2.6 Å分辨率晶体结构已经解析（PDB访问号2I99），为了更好的研究CRYM的结构和功能，我们采用不同的结晶条件生长了μ-crystallin晶体，并在上海光源收到了1.9 Å分辨率的晶体数据，使用分子置换法解析了其相位并最终修正到1.9 Å。通过与2I99的结构比对，发现了与其结构的差异，修正了2I99的结构。二聚化结构域由7个反平行β折叠修正为6个β折叠。NADPH结合结构域常见的Rossmann折叠花样相比2I99少两个β折叠。由于CRYM证实具有酮亚胺还原酶活性，通过与同源蛋白P.putida OCD和A.fulgidus AlaDH比对，分析了CRYM酮亚胺还原酶可能的底物结合位点和催化位点。NADPH pro-R面具有多个保守位点可能参与酮亚胺还原酶活性，其中R47、K75和R119可能为CRYM酮亚胺还原酶结合位点。CYRM中的酸碱催化作用基团可能为H92。B链81-89位残基在晶体结构中的缺失证实了loopEF的柔性以及在底物结合中可能发挥重要的作用。
Funding Project	应物所项目组
Language	中文
Document Type	学位论文
Identifier	http://ir.sinap.ac.cn/handle/331007/9757
Collection	中科院上海应用物理研究所2011-2019年
Recommended Citation GB/T 7714	许新磊. CRYM结构及其酶活分析以及LsrK表达纯化[D]. 中国科学院研究生院,2012.

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